Vse, da pogosto, prefinjeni in dobro opremljeni mikroskopi ne prinašajo odličnih slik zaradi napačne uporabe svetlobnega vira, kar običajno vodi do neustrezne osvetlitve vzorca. Ko je optimiziran, mora biti osvetlitev vzorca svetla, brez bleščanja in enakomerno razpršena v vidnem polju.
Na voljo so številni svetlobni viri za osvetlitev mikroskopov, tako za rutinsko opazovanje kot za kritično fotomikrografijo. Najpogostejši svetlobni vir je zaradi nizke stroškov in dolge življenjske dobe 50 ali 100 vatna volframova halogenska svetilka, kot je prikazano na dnu mikroskopskega diagrama na sliki 1, ki podrobno opisuje tudi optične poti v tipičnem sodobnem oddajanem svetlobnem mikroskopu. Na tej sliki volfralonska svetilka oddaja neprekinjen spekter svetlobe, osredotočen na 3200 K (ko je nastavljen na napetost svetilke +9 voltov), ki se nato prenese skozi kolektor in poljsko lečo, preden se odseva v kondenzator nadomestke in na posnetek. Slike, ki tvorijo svetlobne žarke, zajamejo mikroskopski cilj in jih prenesejo v okularje ali jih usmerjajo z Beamsplitter v eno od več vrat za kamere. Na celotni optični poti mikroskopa je osvetlitev usmerjena in usmerjena skozi vrsto diafragm in leč, ko potuje iz vira, da osvetli vzorec in nato v okuse ali pritrditev kamere. Poravnava optičnih komponent mikroskopa za optimizacijo osvetlitve v sodobnih mikroskopih se izvede po pravilih Köhlerjeve osvetlitve. Več podrobnosti o tem, kako so mikroskopi, ki se oddajajo in odbijajo, poravnani za Proceköhler IlluminationAre, razpravljali v naših razdelkih o postavitvi mikroskopa, ki je bila predvidena svetloba, ki je bila omejena. Optične poti, prikazane zgoraj na sliki 1, so značilne za oddajan svetlobni mikroskop in vključujejo številne leče, diafragme, ogledala in beamsplitters za usmerjanje svetlobe skozi mikroskop.
Tlugsten-halogenske svetilke so razmeroma svetle z barvnim spektrom, osredotočenim na 3200 K (ko je nastavljeno na približno +9 voltov), vendar potrebujejo filtre za pretvorbo barv, da dvignejo barvno temperaturo na enakovrednost dnevne svetlobe. Drug priljubljeni svetlobni vir je svetilka ksenona od 75 do 150 vatov zaradi zelo visoke svetlosti in dolge življenjske dobe, relativno enakomernega izhoda po vizualnem spektru in barvne temperature, ki se približa, ki jo zahtevajo emulzije filma dnevne svetlobe. Kadar je potrebna zelo visoka intenzivnost svetlobe, se pogosto uporabljajo svetilke iz kositra. Intorescencemimicroskopija, zlasti za namene kritične fotomikrografije, se pogosto uporabljajo 100 vatov ali 200 vatov živosrebnih gorilnikov. V prejšnjih letih bi lahko uporabili luči ogljikovih lokov ali cirkonijeve žarnice, vendar so te vire danes redko vidne. Če želite več informacij in podrobno razpravo o širokem spektru svetilk, ki so na voljo za osvetlitev mikroskopa, obiščite naš razdelek na virih za mikroskopijo in fotomikrografijo.
Poravnava osvetlitve vira skozi optične poti v odsevni svetlobni mikroskopiji je tudi glavna skrb, zlasti glede metalografije, pregledovanja polprevodniških rezin in izjemnega novega napredka v fluorescenčni mikroskopiji. Odsevni svetlobni mikroskopi so tudi osvetljeni z različnimi svetlobnimi viri (kot je razloženo zgoraj) in jih je mogoče prilagoditi za optimalno delovanje z uporabo Köhlerjeve osvetlitve. O tem podrobneje obravnavamo v našem razdelku o konfiguraciji Osvetlitve Köhler za odsevno svetlobno mikroskopijo. Osvetlitvene poti za odsevno svetlobno mikroskopijo so tudi tema več interaktivnih vaj Java, vključno s tistimi, povezanimi neposredno spodaj.
John Dellyargues v svoji odlični knjigi "Fotografija skozi mikroskop", ki je med 80 in 90 odstotkov vseh fotomikrografov, predloženih na tekmovanja, razstave in znanstvene publikacije, žrtve nepravilno usklajene optike, ki ima za posledico slabe vzorčne osvetlitve. To je ena najpogostejših težav z mikroskopijo in fotomikrografijo na splošno, presenetljiv pregled študentskih mikroskopov v številnih univerzitetnih laboratorijih pa bo razkril obilo slabo prilagojenih kondenzatorjev in virov osvetlitve. Sumimo, da sta napačna poravnava in prilagajanje kondenzatorja substiranja in poljske diafragme v celotnem območju ciljev v danem mikroskopu največji vir napak v fotomikrografiji.
Potrebe po pravilni osvetlitvi ni mogoče preveč poudariti. Prepogosto se mikroskop 000 000 zmanjša na raven ročne lupe z nepravilno osvetlitvijo in poravnavo, kar ima za posledico fotomikrografije, ki jih presegajo tisti, ki jih jemljemo z mikroskopom v višini 2000 dolarjev v optimalnih pogojih Of Köhlerjeve osvetlitve. V spremljevalnih razdelkih tega temeljnega premaza, ki se ukvarja s teorijo Köhlerjeve osvetlitve in njeno izvedbo (tako ForTransMettedDrefleflecedlight), razpravljamo
